STAT3特异性小干扰RNA表达载体的构建及其对STAT3表达的抑制

• 作者: 何蕴韶 吴健 王方金
• 来源期刊: 肿瘤
• 学科: 医学
• 关键词: RNA,小干扰 转录激活因子3 细胞系,肿瘤 PC-3细胞
• 年，卷（期）: 2005,（1）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 37-40
• 页数: 4页
• 分类号: Q784|R737.25
• 字数: 3305字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3781/j.issn.1000-7431.2005.01.010

摘要

目的构建特异性抑制信号转导与转录激活因子3(STAT3)的小干扰RNA(siRNA)表达载体并检测其对STAT3表达及PC-3细胞增殖的抑制作用.方法设计、合成STAT3特异性的短链寡核苷酸,经退火形成双链DNA片段,克隆到pSilen-cerTM2.1-U6载体中,构建STAT3特异siRNA的表达载体,Hind Ⅲ和BamH Ⅰ双酶切及测序鉴定重组体,并转染PC-3细胞,G418筛选出稳定表达细胞株,半定量反转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法和免疫印迹法检测STAT3 mRNA和蛋白的表达水平,四甲基偶氮唑蓝(MTT)检测细胞增殖活性.结果经双酶切与测序鉴定成功构建STAT3-siRNA表达载体,转染前列腺癌细胞株PC-3可显著抑制细胞中STAT3 mRNA和蛋白的表达水平(抑制率分别为52.4%及50.5%),且细胞增殖活性亦较未转染PC-3细胞显著降低(p＜0.05).结论运用pSilencerTM2.1-U6载体构建的STAT3-siRNA表达载体可有效抑制STAT3的表达及前列腺癌细胞的增殖.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	何蕴韶	中山大学基础医学院人体解剖教研室	59	341	10.0	15.0
2	王方金	中山大学基础医学院人体解剖教研室	15	105	5.0	10.0
3	吴健	中山大学基础医学院人体解剖教研室	5	13	2.0	3.0