优化心肌膜蛋白提取方法及心肌缺血时间隙连接蛋白43的表达变化

• 作者: 于海燕 岳朋 张勇 杨宝峰 林道红 潘振伟 王宁 肖静
• 来源期刊: 哈尔滨医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 膜蛋白 间隙连接蛋白43 免疫印迹 聚丙烯酰胺凝胶电泳 毒蕈碱型乙酰碱受体
• 年，卷（期）: 2005,（6）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 474-478
• 页数: 5页
• 分类号: R373.13
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-1905.2005.06.002

摘要

目的优化膜蛋白提取方法,以便研究心肌缺血时connexin 43(间隙连接蛋白43)的表达变化.方法①差速离心法结合溶剂提取法提取心肌膜蛋白,溶解膜蛋白时比较了6组方案,通过各组方案在聚丙烯酰胺凝胶电泳中条带分布差异筛选出最佳方案,分析心肌细胞膜表面受体表达.②通过左冠脉结扎造成对照组、5min、20min、60min心肌缺血组,研究缺血时心肌connexin 43表达变化.结果①最终选择RIPA含4% SDS来溶解膜蛋白,并成功检测出connexin 43,β-actin(管家蛋白),M受体(毒蕈碱型乙酰碱受体)等膜蛋白.②免疫印迹技术检测缺血不同时相connexin 43表达变化,5min、20min、60min缺血组相对对照组分别减少20%、60%、76%.结论应用此方案能成功提取心肌膜蛋白,为进一步研究心肌缺血时connexin 43的表达变化奠定了基础.