稳定过表达smac基因胃癌细胞株的建立及其化疗敏感性研究

• 作者: 张波 汪良 童强松 郑丽端 陶凯雄
• 来源期刊: 肿瘤防治研究
• 学科: 医学
• 关键词: 胃癌 smac基因 基因表达 细胞凋亡
• 年，卷（期）: 2005,（1）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 18-21
• 页数: 4页
• 分类号: R735.2
• 字数: 3346字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3971/j.issn.1000-8578.2005.01.007

摘要

目的探讨smac基因过表达对胃癌细胞株化疗敏感性的影响.方法采用脂质体将smac基因真核表达载体pcDNA3.1-smac及空白载体pcDNA3.1转染入胃癌细胞株MKN-45,G418筛选获得抗性亚克隆细胞株,RT-PCR和Western Blot检测癌细胞smac基因表达,四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法、克隆形成实验检测丝裂霉素(MMC)对癌细胞的生长抑制效率.结果建立分别稳定表达smac基因、新霉素抗性基因(neo)的胃癌亚克隆细胞株MKN-45/smac、MKN-45/neo.RT-PCR和Western Blot证实MKN-45/smac细胞的smac mRNA及蛋白表达水平均显著高于MKN-45、MKN-45/neo(P＜0.01).10μg/ml MMC作用24h后,MKN-45、MKN-45/neo细胞生长抑制率分别为27.85%、28.12%,而MKN-45/smac则高达43.71%(P＜0.01);同MKN-45、MKN-45/neo细胞株比较,MKN-45/smac的克隆形成能力分别降低了14.07%(P＜0.01)、15.13%(P＜0.01).结论稳定转染smac基因使其在胃癌细胞株中过表达,能显著提高癌细胞对MMC的敏感性,为改善胃癌化疗效果奠定了实验基础.