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摘要:
目的:获得小鼠脂联素(adiponectin,ADPN)在肝脏的高效稳定表达,方法:构建含肝脏特异性启动子hAATp和增强子ApoEHCR的小鼠脂联素基因(mAd)的真核表达载体pAA-neo-mAd.以绿色荧光蛋白(green fluorescent protein, GFP)为报告基因证明该载体在COS-7细胞中表达后,流体动力法(hydrodynamics-based procedure)通过尾静脉注射将其导入小鼠肝脏,通过肝脏mAd mRNA定量(半定量RT-PCR法)、免疫组织化学检测及血清脂联素水平测定(定量ELISA法)鉴定脂联素在肝脏的表达及表达效率.结果:肝组织RT-PCR的结果显示,注射后12 h肝脏内即可检测到mAd mRNA的表达,且能持续表达6周以上.24 h后血清脂联素水平显著升高,48 h达到峰值,一直持续6周后仍明显高于正常水平.肝脏脂联素免疫组化染色呈阳性.结论:流体动力法能有效地将质粒载体pAA-neo-mAd导入小鼠肝脏,并能在小鼠肝脏高效稳定地表达重组小鼠脂联素.
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文献信息
篇名 脂联素在小鼠肝脏的高效稳定表达
来源期刊 军事医学科学院院刊 学科 生物学
关键词 脂联素 流体动力法 肝脏 质粒载体 体内转基因表达
年,卷(期) 2005,(5) 所属期刊栏目 论著
研究方向 页码范围 439-443
页数 5页 分类号 Q578
字数 3667字 语种 中文
DOI 10.3969/j.issn.1674-9960.2005.05.011
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 贾帅争 军事医学科学院野战输血研究所 25 78 5.0 7.0
2 孙红琰 军事医学科学院野战输血研究所 20 155 8.0 12.0
3 王全立 解放军总医院输血科 8 20 3.0 3.0
4 詹林盛 军事医学科学院野战输血研究所 64 450 11.0 19.0
5 陈竞新 军事医学科学院野战输血研究所 5 19 2.0 4.0
6 王会中 8 42 4.0 6.0
8 付秋霞 军事医学科学院野战输血研究所 12 32 3.0 5.0
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研究主题发展历程
节点文献
脂联素
流体动力法
肝脏
质粒载体
体内转基因表达
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研究来源
研究分支
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军事医学
月刊
1674-9960
11-5950/R
大16开
北京太平路27号
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