转化生长因子-β/Smad信号对人横纹肌肉瘤细胞RD生长和凋亡的调控

• 作者: 叶绿 张红英 杨光华 步宏 郭华
• 来源期刊: 中华病理学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 转化生长因子β RNA 横纹肌肉瘤 细胞,培养的
• 年，卷（期）: 2005,（7）
• 所属期刊栏目: 实验病理学
• 页码范围: 407-412
• 页数: 6页
• 分类号: R73
• 字数: 5816字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j.issn:0529-5807.2005.07.006

摘要

目的研究TGF-β/Smad信号对人胚胎性横纹肌肉瘤细胞系RD生长和凋亡的调控作用.方法采用小分子RNA干扰(RNAi)技术,以阳离子脂质体为载体,将生物合成的发夹状短链RNA(shRNA)转染RD细胞,封闭Smad4的表达以阻碍内源性TGF-β/Smad信号的转导;采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot检验shRNA干扰Smad4表达的效果;采用免疫荧光化学,通过激光共聚焦显微镜检测Smad4封闭前后RD细胞中Smad2/3表达位置的变化;应用四甲基偶氮唑盐(MTT)和3H-thymidine摄入实验检测阻碍内源性TGF-β/Smad信号转导和以外源性TGF-β1刺激这2种条件下RD细胞的生长状况;采用流式细胞术和荧光化学染色检测上述2种条件下RD细胞的凋亡情况.结果 RNAi技术可有效封闭RD细胞中Smad4 mRNA和蛋白的表达;Smad4的封闭导致Smad2/3由胞质入核明显减少;内源性TGF-β/Smad信号转导受阻不但抑制RD细胞生长,并且诱导凋亡;外源性、较高浓度的TGF-β1可抑制RD细胞生长,但不诱导凋亡.结论 TGF-β/Smad信号在一定的浓度范围内精细调控RD细胞的生长和凋亡.