摘要:
目的研究热休克蛋白70(HSP70)的表达在二氢二醇环氧苯并(a)芘(BPDE)致DNA损伤中的作用.方法培养人肺腺癌A549细胞,作如下处理:BPDE染毒组:以不同剂量BPDE(0、2、4、8μmol/L)染毒2 h;预热+BPDE染毒组:细胞预热(42℃2 h,37℃恢复1 h)后,再按BPDE染毒组同样处理,各组均设溶剂对照.采用单细胞凝胶电泳技术和Western blot法分别检测DNA的损伤情况与HSP70的表达.结果(1)DNA损伤情况:BPDE染毒组DNA损伤程度随BPDE染毒剂量增加而加强,明显高于溶剂对照,差异有统计学意义(P<0.01),组间相互比较,差异亦有统计学意义(P<0.01),且DNA损伤程度与BPDE染毒剂量呈正相关(r=0.96,P<0.05);预热+BPDE染毒组DNA损伤程度随BPDE染毒浓度递增,与预热溶剂对照相比,差异有统计学意义(P<0.01),但在4、8μmol/L的BPDE组间,DNA损伤程度的差异无统计学意义(P>0.05),与BPDE染毒组比较,各剂量下DNA损伤程度均明显增加.(2)HSP70表达情况:BPDE染毒组在2、4 μmol/L的BPDE作用时HSP70表达逐渐升高,与溶剂对照相比,差异有统计学意义(P<0.05),但在8 μmol/L剂量时,表达下调,与溶剂对照组相比,差异无统计学意义(P>0.05);预热+BPDE染毒组HSP70的表达均比预热溶剂对照明增加,在4 μmol/L的BPDE作用时HSP70表达水平最高,与2、8μmol/L剂量组相比,差异有统计学意义(P<0.05).与BPDE染毒组相比,各剂量下HSP70的表达水平均明显增加,差异均有统计学意义(P<0.01).结论HSP70对BPDE所致A549细胞DNA损伤的保护作用并不明显.