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摘要:
目的研究转染survivin 反义mRNA对Jurkat淋巴瘤细胞生长的影响以及转染后淋巴瘤细胞对化疗药物的敏感性.方法构建survivin 反义mRNA真核表达质粒pcDNA3.1-反义(As)survivin;利用脂质体转染法将其转入高表达survivin mRNA T淋巴母细胞淋巴瘤Jurkat细胞系,用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)、免疫组织化学SP法、Western印迹法检测细胞中survivin表达;用细胞计数、流式细胞术(FCM)检测其细胞生长曲线、细胞凋亡指数,并进行光镜、电镜形态学观察;并对转染pcDNA3.1-Assurvivin前后Jurkat细胞分别加入4-羟基-环磷酰胺(CTX)、甲氨蝶呤(MTX)72 h后,常规MTT检测细胞存活率.结果 RT-PCR检测转染pcDNA3.1-Assurvivin后48 h、5和6周Jurkat细胞survivin mRNA表达,发现survivin mRNA表达皆低于对照组;转染后survivin蛋白表达也明显降低.转染pcDNA3.1-Assurvivin后Jurkat细胞生长倍增时间(52 h)明显延长;用FCM检测细胞凋亡发现,转染pcDNA3.1-Assurvivin后Jurkat细胞凋亡指数[20.2%(48 h)]明显高于对照组(转染空质粒和未转染组,2.1%和1.3%);5和6周为6.2%和6.8%,明显高于未转染细胞(1.3%和1.0%).光镜、电镜观察见转染细胞出现较多凋亡细胞及一些变性肿胀细胞;MTT检测结果显示Jurkat细胞转染前后,经化疗药物4-羟基-环磷酰胺和甲氨蝶呤作用,转染细胞的抑制率明显大于未转染组,差异有统计学意义(P<0.05).结论 survivin基因对Jurkat细胞系的生长起着重要的作用,抑制survivin 基因表达在T淋巴母细胞淋巴瘤治疗中可能有重要的意义,该基因似可能作为治疗的靶点.
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文献信息
篇名 转染survivin反义mRNA对Jurkat淋巴瘤细胞生长和化疗敏感性的影响
来源期刊 中华病理学杂志 学科 医学
关键词 淋巴瘤 药物筛选试验,抗肿瘤 转染 RNA,反义 基因,survivin
年,卷(期) 2005,(11) 所属期刊栏目 实验病理学
研究方向 页码范围 737-741
页数 5页 分类号 R73
字数 3122字 语种 中文
DOI 10.3760/j.issn:0529-5807.2005.11.009
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 顾霞 新疆医科大学附属第一医院病理科 33 145 8.0 9.0
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淋巴瘤
药物筛选试验,抗肿瘤
转染
RNA,反义
基因,survivin
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