溶酶体参与蓖麻毒素A链降解途径的研究

• 作者: 沈建根 沈芬平 詹金彪 陈春
• 来源期刊: 浙江大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 蓖麻蛋白 蓖麻毒素A链 溶酶体 重组,遗传 肿瘤细胞,培养的
• 年，卷（期）: 2005,（3）
• 所属期刊栏目: 专题报道
• 页码范围: 212-216
• 页数: 5页
• 分类号: R996.2
• 字数: 3185字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3785/j.issn.1008-9292.2005.03.004

摘要

目的:研究溶酶体在蓖麻毒素A链(RTA)细胞内转运过程中的作用.方法:用DNA重组技术,将溶酶体的靶向信号肽KFERQ连接在RTA的羧基端;将构建好的重组质粒pKK223.3-RTA和pKK223.3-RTA-KFERQ转化感受态大肠杆菌JM109,经IPTG诱导表达RTA和RTA-KFERQ蛋白;重组蛋白质用Blue-Sepharose6B亲和柱纯化,以MTT法分别测定纯化后的RTA与RTA-KFERQ蛋白对体外培养的HEPG2(人肝癌细胞)、Hela(人宫颈癌细胞)、A549(人肺癌细胞)3种细胞的毒性作用.结果:在大肠杆菌中成功表达了RTA和RTA-KFERQ.与RTA相比较,纯化的重组蛋白在体外有相似的蛋白质合成抑制活性,RTA-KFERQ对HEPG2、Hela和A549细胞的毒性分别减少了约49.87%、54.18%、88.68%.结论:RTA不能完全被溶酶体灭活,RTA可能存在溶酶体外的降解途径.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	沈建根	浙江大学医学院免疫学教研室	30	178	8.0	12.0
2	詹金彪	浙江大学医学院生物化学与分子生物学教研室	45	200	8.0	12.0
3	陈春	浙江大学医学院生物化学与分子生物学教研室	8	52	3.0	7.0
4	沈芬平	浙江大学医学院免疫学教研室	12	77	5.0	8.0