人乳铁蛋白cDNA的克隆及在家蚕细胞中的表达

• 作者: 刘涛 吴祥甫 张耀洲
• 来源期刊: 蚕业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 人乳铁蛋白cDNA 家蚕细胞 重组杆状病毒
• 年，卷（期）: 2005,（3）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 280-285
• 页数: 6页
• 分类号: Q78|S881.2
• 字数: 4177字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0257-4799.2005.03.009

摘要

从人的乳腺组织中克隆了人乳铁蛋白(hLF)cDNA,其DNA序列与GenBank中另外4个hLF cDNA序列具有高度的同源性(同源性达到99%).将人乳铁蛋白cDNA克隆在质粒pBacPAK8的BamHⅠ位点和XhoⅠ位点,构建成重组转移质粒pBacPAK-hLF.该质粒DNA与已线性化BacPAK6 DNA共转染家蚕细胞BmN,在培养的贴壁细胞中挑出空斑,经过3轮纯化,获得重组病毒BmNPV-hLF.蛋白质免疫印迹法检测到在重组病毒感染的家蚕细胞中存在人乳铁蛋白基因的表达产物,分子量约78 kD,ELISA法测定结果表明家蚕细胞中重组人乳铁蛋白(rhLF)相对表达量在表达120 h达到最高值,约为13.5 mg/L.体外生物活性试验表明重组hLF对大肠杆菌JM109具有抑菌活性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张耀洲	浙江理工大学生物化学研究所	87	372	9.0	15.0
2	吴祥甫	中国科学院上海生物化学与细胞生物学研究所	78	677	14.0	24.0
3	刘涛	浙江大学生物化学研究所	44	282	9.0	16.0