基因表达谱芯片技术筛选乙型肝炎病毒DNA多聚酶P结构域反式调节基因

• 作者: 刘妍 张健 张玲霞 成军 李莉 王琳 邵清 陈国凤
• 来源期刊: 军医进修学院学报
• 学科: 医学
• 关键词: 肝炎病毒,乙型 DNA多聚酶 基因
• 年，卷（期）: 2005,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 107-109
• 页数: 3页
• 分类号: R373.21
• 字数: 1870字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-1139.2005.02.010

摘要

目的:应用基因芯片技术,对乙型肝炎病毒DNA(HBVDNA)聚合酶P结构域蛋白/逆转录酶(PR)的基因表达谱进行分析,探索PR对肝细胞基因表达的调节机制及其生物学功能.方法:设计并合成PR基因序列特异性的引物,应用聚合酶链反应(PCR)技术扩增PR蛋白编码基因片段,以常规的分子生物学技术将获得的PR编码基因片段克隆到TA载体中进行核苷酸序列的测定,构建真核表达载体pcDNA3.1(-)-PR.以脂质体转染肝母细胞瘤细胞系HepG2,提取mRNA,逆转录为cDNA,与转染空白表达载体pcDNA3.1(-)的HepG2细胞进行DNA芯片分析.结果:基因芯片技术所检测的1 152个基因表达谱的筛选中,79条基因表达水平上调,90条基因表达水平下调.结论:应用基因表达谱芯片成功筛选了HBV DNA聚合酶PR转染细胞后差异表达基因,为进一步阐明PR蛋白可能的分子生物学机制提供依据.