骨髓间质干细胞的分离培养与鉴定

• 作者: 冯敏 王亭忠 耿涛 董安平 蒋文慧 许正云 郑小璞 马爱群
• 来源期刊: 西安交通大学学报（医学版）
• 关键词: 骨髓间充质干细胞 分离培养 鉴定 兔
• 年，卷（期）: 2005,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 224-227
• 页数: 4页
• 分类号: R329.2
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-8259.2005.03.007

摘要

目的建立兔骨髓间质干细胞(MSCs)的体外分离纯化、扩增和鉴定的方法,为MSCs的进一步诱导分化和应用奠定基础.方法抽取兔胫骨骨髓,密度梯度离心,得到骨髓单个核细胞, 接种后形成单层贴壁细胞,经胰蛋白酶消化后传代培养扩增,倒置显微镜下观察原代和传代细胞的生长特性.通过免疫荧光组织化学、流式细胞分析和透射电镜鉴定细胞.结果分离培养的骨髓MSCs贴壁、呈梭形,原代细胞呈集落生长,7～10 d达到融合,传代后增殖速度加快;骨髓MSCs表达CD90,反复传代后表达效率增高,不表达CD34;透射电镜可见细胞表面有大量的绒毛突起,胞浆中有丰富的粗面内质网和线粒体,核大,形态不规则.结论密度梯度离心结合贴壁法,以及消化传代能有效分离纯化和扩增骨髓MSCs,分离培养的细胞具有骨髓MSCs的基本表型和特性.