幽门螺杆菌空泡毒素活性的体外观察

• 作者: 屠振兴 李兆申 杜奕奇 苏暾 龚燕芳
• 来源期刊: 上海医学
• 关键词: 幽门螺杆菌 空泡毒素 中性红摄入
• 年，卷（期）: 2005,（10）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 858-861
• 页数: 5页
• 分类号: R3
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0253-9934.2005.10.016

摘要

目的研究幽门螺杆菌(Hp)液体浓缩上清液对胃上皮细胞的空泡毒性作用,为进一步开展空泡变性细胞毒素(VacA)的纯化及探讨VacA的致病机制奠定基础.方法将Hp菌株液体培养上清液制成粗制VacA蛋白,粗制VacA经倍比稀释(1:160～1:2)后与胃癌SGC-7901细胞共同孵育后观察胃癌细胞形态变化,同时观察1:2及1:5滴度组于0、2、4、8、16和24 h时的空泡活性.采用中性红摄入法(NRU)评价空泡活性.结果1:2及1:5滴度组胃癌细胞于24 h时空泡形成细胞达100%,空泡细胞比例随毒素滴度递减.孵育24 h时粗制VacA产生空泡活性的最小剂量约为6μg,超过120μg可导致细胞死亡.当毒素滴度为1:2时,孵育4 h即产生明显空泡[550 nm光吸收值(A550)=0.43±0.06],至16 h达最高吸收值(A55o=0.71±0.03),至24 h时因细胞大量死亡,A550反而下降至0.06±0.04,与空白对照组的差异无显著性(P＞0.05).1:5毒素滴度的时间曲线较1:2滴度更恰当反映出空泡活性随孵育时间变化的特性.结论Hp液体培养上清浓缩液对胃癌细胞具有明显的空泡毒性作用,VacA导致的空泡毒性具有明显的浓度及时间依赖性,且易受多种因素的影响,适当的浓度及孵育时间是VacA致病机制研究过程中的关键因素.