番茄ACC合酶(LeACS2)在大肠杆菌中的可溶性表达

• 作者: 周惠 屈良鹄 徐增富 李凝 李剑峰
• 来源期刊: 中山大学学报（自然科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 番茄 ACC合酶 GST融合表达 可溶性 纯化 酶活
• 年，卷（期）: 2005,（6）
• 页码范围: 71-74,78
• 页数: 5页
• 分类号: Q78
• 字数: 2946字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0529-6579.2005.06.019

摘要

植物激素乙烯参与了植物生长发育等一系列生理过程,通过控制乙烯的合成进而控制经济作物的衰老和果实的成熟,给农业带来深远影响.ACC合酶是高等植物乙烯生物合成的限速酶.通过RT-PCR将番茄ACC合酶(LeACS2)cDNA克隆至大肠杆菌表达载体pET30a中并使之与GST 编码序列进行融合而构建了重组表达质粒pET-LeACS2-GST.转化获得含有该重组表达质粒的大肠杆菌BL21 starTM(DE3) pLysS细胞,在IPTG的诱导下成功表达出含有LeACS2的大小约83 000的融合蛋白.该融合蛋白具有较好的可溶性.通过GST亲和层析和MonoQ阴离子交换两步纯化后的LeACS2能够催化其底物SAM生成ACC.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李凝	香港科技大学生物系	8	85	5.0	8.0