角膜缘干细胞克隆化培养影响因素的研究

• 作者: 张文华 接英 武宇影 潘志强 王颖
• 来源期刊: 眼科
• 学科: 医学
• 关键词: 角膜缘干细胞 饲细胞 体外培养
• 年，卷（期）: 2005,（3）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 191-194
• 页数: 4页
• 分类号: R772
• 字数: 2833字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-4469.2005.03.017

摘要

目的探讨丝裂霉素C处理Swiss-3T3成纤维细胞作为饲细胞的条件,了解兔角膜缘于细胞克隆化培养的增殖状况.设计对照实验研究.研究对象兔角膜缘干细胞单纯培养组,兔角膜缘干细胞与Swiss-3T3成纤维细胞作为饲细胞的混合培养组.方法采用DMEM/F12培养基进行细胞培养,观察4.0μμg/ml丝裂霉素C作用不同时间后3T3细胞数量的变化.DispaseⅡ酶消化兔角膜缘上皮细胞,与饲细胞混合接种,观察干细胞克隆形成情况,比较各代、各组的细胞克隆形成率(CFE).用EDTA去除饲细胞,间接免疫荧光染色检测角膜缘干细胞克隆团表达增殖细胞核抗原(PCNA)情况.主要指标细胞数/毫升,细胞克隆形成率.结果4.0μg/ml丝裂霉素C处理2.5小时的Swiss-3T3细胞,培养期间(约12日)细胞数量无明显变化,可作为饲细胞.与饲细胞共同培养的兔角膜缘干细胞形成细胞克隆团,细胞的平均CFE比较:有饲细胞组角膜缘干细胞明显高于无饲细胞组(t=2.982,P<0.01).兔角膜缘干细胞冻存复苏后平均CFE比较,有饲细胞组明显高于无饲细胞组(t=3.007,P<0.01).兔角膜缘干细胞克隆团中细胞PCNA染色为阳性.结论角膜缘干细胞与作为饲细胞的Swiss-3T3成纤维细胞共同培养形成细胞克隆,其中含有干细胞,且具有高增殖力.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王颖	北京朝阳医院眼科	1	0	0.0	0.0