新城疫病毒HN蛋白球状头部在T4噬菌体衣壳表面的展示

• 作者: 刘铀 曹永长 毕英佐 肖俊芳 马静云
• 来源期刊: 中国兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 新城疫病毒 T4噬菌体 HN蛋白 展示
• 年，卷（期）: 2005,（4）
• 所属期刊栏目: 预防兽医学
• 页码范围: 346-349
• 页数: 4页
• 分类号: S852.65
• 字数: 3458字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-4545.2005.04.004

摘要

用RT-PCR扩增新城疫病毒(NDV)hn基因,得到大小约1 700bp的片段,将其克隆至pGEM-T easy载体并测定其核苷酸序列.根据测序结果,另设计1对引物带有EcoR I限制位点,用PCR扩增基因主要功能区即编码HN蛋白球状头部的hngd片段,将其分别克隆至pSOC和pR质粒soc基因3'端,重组质粒pSOC-HNGD转化E.coli BL-21(DE3)感受态细胞,以终浓度1 mmol/L的IPTG诱导表达,在SDS-PAGE凝胶上检测到相对分子质量大小约67 000的目的蛋白条带.随后将重组质粒pR-HNGD转化T4宿主菌E2感受态细胞,阳性克隆用溶菌酶缺陷的T4-Z1感染,用不加溶菌酶的SC平板筛选阳性克隆.经PCR鉴定,hngd片段已整合在T4-Z1的基因组中.纯化后的重组噬菌体T4-Zl-HNGD用SDS-PAGE和Western-blot可检测到67 000的特异条带.结果表明,HNGD蛋白成功展示在T4噬菌体衣壳表面,且与NDV抗血清具有良好的反应性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	毕英佐	华南农业大学动物科学学院	216	2631	28.0	41.0
2	曹永长	华南农业大学动物科学学院	111	1387	20.0	31.0
3	马静云	华南农业大学动物科学学院	87	548	13.0	19.0
4	刘铀	华南农业大学动物科学学院	10	46	4.0	6.0
5	肖俊芳	华南农业大学动物科学学院	3	6	2.0	2.0