磁珠富集法筛选白鲢的微卫星分子标记

• 作者: 孙效文 曹洁 梁利群 鲁翠云
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 农学
• 关键词: 磁珠富集 白鲢 微卫星
• 年，卷（期）: 2005,（6）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 772-776
• 页数: 5页
• 分类号: S9
• 字数: 4191字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2005.06.017

摘要

通过磁珠富集法筛选白鲢(Hypophthalmichtys molitrix)的微卫星分子标记.从血液中提取白鲢大片段基因组DNA,限制性内切酶Sau3AI部分消化,使大部分片段介于400～900bp,低熔点琼脂糖凝胶回收.在筛选的基因组片段上连接1个20bp的双链接头,构建白鲢全基因组PCR文库,用生物素标记的微卫星探针(CA)15进行筛选,磁珠富集含有微卫星序列的DNA片段,获得含有微卫星的单链序列;将这些序列通过PCR扩增,连接pGEM-T载体,转化入感受态大肠杆菌(Escherichia coli)DH5α,得到一个微卫星序列文库;又经同位素标记的微卫星探针(CA)15进行第2次筛选,获得149个阳性克隆,经测序分析,获得微卫星序列138个,这可用引物设计软件PrimerPremier 5.0设计引物81对.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	孙效文	中国水产科学院黑龙江水产研究所	159	3935	35.0	57.0
2	曹洁		5	113	4.0	5.0
3	梁利群	中国水产科学院黑龙江水产研究所	91	2491	28.0	47.0
4	鲁翠云	中国水产科学院黑龙江水产研究所	47	1092	18.0	32.0