Ⅱ型人多巴胺受体逆转录病毒载体的构建及表达

• 作者: 刘延英 杨慧 赵春礼 赵焕英 鲁强 鲁玲玲
• 来源期刊: 解剖学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 多巴胺D2受体 帕金森病 基因治疗 原位杂交 人
• 年，卷（期）: 2005,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 356-360
• 页数: 5页
• 分类号: Q742.5|Q781
• 字数: 4757字
• 语种: 英文
• DOI: 10.3321/j.issn:0529-1356.2005.04.005

摘要

目的构建人全长D2R基因真核表达载体,研究D2R在帕金森病(PD)中的作用和机制.方法将D,R cDNA片段克隆于pLNCX2逆转录病毒载体,转染成纤维包装细胞系PT67,G418筛选单克隆后进行传代培养,通过原位杂交、免疫组织化学和Western blot检测其表达效果.病毒上清再感染骨髓基质细胞(MSCs),免疫荧光检测D2R基因表达率.结果成功构建了逆转录病毒表达载体pLNCX2-D2R,原位杂交证实D2R基因在PT-67表达的阳性率为80%以上,免疫组织化学检测可见其蛋白分布在胞浆和胞膜,细胞裂解后Western blot蛋白电泳可检测到约48.84kD的蛋白.经转染D2R基因的PT67细胞能分泌病毒并感染MSCs.结论逆转录病毒介导的D2R基因经PT67细胞包装后,能够产生病毒颗粒,收集含病毒颗粒的上清可进一步感染MSCs,这种经逆转录病毒介导的D2R基因可用来作针对帕金森病进行基因治疗的研究.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	鲁强	首都医科大学北京神经科学研究所北京市神经再生修复重点实验室	30	143	8.0	10.0
2	赵焕英	首都医科大学北京神经科学研究所北京市神经再生修复重点实验室	55	178	7.0	11.0
3	赵春礼	首都医科大学北京神经科学研究所北京市神经再生修复重点实验室	45	182	8.0	11.0
4	鲁玲玲	首都医科大学北京神经科学研究所北京市神经再生修复重点实验室	8	20	2.0	4.0
5	刘延英	首都医科大学北京神经科学研究所北京市神经再生修复重点实验室	3	9	2.0	3.0