大菱鲆肠道蛋白酶的分离纯化及性质的初步研究

• 作者: 孙谧 王海英 王清印 王跃军 薛长湖
• 来源期刊: 水产学报
• 学科: 农学
• 关键词: 大菱鲆 肠蛋白酶 纯化 性质
• 年，卷（期）: 2005,（5）
• 页码范围: 624-629
• 页数: 6页
• 分类号: S917
• 字数: 3814字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-0615.2005.05.007

摘要

以大菱鲆肠道为材料,对大菱鲆消化生理中起重要作用的肠蛋白酶的分离纯化条件和理化性质进行了研究.经Tris-HCl缓冲液抽提,硫酸铵分级分离,DEAE-Sepharose Fast Flow离子交换层析、Sephadex G-100 凝胶过滤层析分离纯化,获得大菱鲆肠蛋白酶Ⅰ的电泳纯制品,并对该酶的性质进行了研究.结果显示:纯酶的分子量约为58 kD.纯酶最适反应pH为9.0,最适反应温度50 ℃;pH稳定范围 6.0～11.0,30 ℃以下酶活性稳定;Mn2+可激活大菱鲆肠蛋白酶Ⅰ,Cu2+、Zn2+、Ag+、Fe3+则对酶活性有抑制作用;巯基蛋白酶抑制剂显著抑制大菱鲆肠蛋白酶Ⅰ的活性,金属蛋白酶抑制剂对大菱鲆肠蛋白酶Ⅰ无影响.50 ℃、pH 9.0条件下以双倒数作图法得大菱鲆肠蛋白酶Ⅰ催化酪蛋白水解的Km值为2.92 g·L-1.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王海英	中国水产科学研究院黄海水产研究所	39	396	12.0	18.0
2	孙谧	中国水产科学研究院黄海水产研究所	97	1319	19.0	32.0
3	薛长湖	中国海洋大学生命科学与技术学部	475	6355	39.0	54.0
4	王跃军	中国水产科学研究院黄海水产研究所	64	933	17.0	27.0
5	王清印	中国水产科学研究院黄海水产研究所	118	3069	34.0	50.0