应用RNAi抑制细胞中绿色荧光蛋白的表达

• 作者: 任兆瑞 张敬之 曾溢滔 谢书阳 黄淑帧
• 来源期刊: 中华医学遗传学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: RNA干扰 Mel细胞 绿色荧光蛋白
• 年，卷（期）: 2005,（4）
• 所属期刊栏目: 实验报告
• 页码范围: 431-434
• 页数: 4页
• 分类号: R3
• 字数: 2663字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j.issn:1003-9406.2005.04.018

摘要

目的在293T和Mel细胞中研究RNA干扰(RNA interference, RNAi)对绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein, eGFP)表达的沉默作用.方法以巢式PCR方法从人胚肾293T细胞中克隆出依赖于RNA 聚合酶Ⅲ的H1启动子,并用于驱动RNAi片段的合成; 构建能抑制eGFP特异性表达的RNAi载体(TR1).将eGFP载体和RNAi干扰载体共转染293T和Mel两类细胞中,应用荧光显微镜观察、逆转录-PCR、荧光辅助细胞分选技术和定量逆转录-PCR方法分析上述细胞中RNAi对eGFP表达的抑制情况. 结果 RNAi载体能有效地使293T和Mel细胞中红系特异的eGFP表达量均降低约50%以上. 结论本文构建的RNAi载体能有效的抑制目的基因eGFP在细胞中的表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张敬之	上海交通大学医学遗传研究所	14	98	4.0	9.0
2	谢书阳	上海交通大学医学遗传研究所	4	80	3.0	4.0
3	任兆瑞	上海交通大学医学遗传研究所	24	160	8.0	12.0
4	曾溢滔	上海交通大学医学遗传研究所	15	61	5.0	7.0
5	黄淑帧	上海交通大学医学遗传研究所	18	74	5.0	7.0