基因免疫法在制备凝血酶调节蛋白抗体中的应用研究

• 作者: 李稻 王红 王鸿利 郑佐娅 钱高潮
• 来源期刊: 中华检验医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 凝血酶调节蛋白 基因免疫 抗体
• 年，卷（期）: 2005,（4）
• 所属期刊栏目: 基础实验诊断研究
• 页码范围: 412-416
• 页数: 5页
• 分类号: R4
• 字数: 4394字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j:issn:1009-9158.2005.04.025

摘要

目的探讨应用基因免疫法制备凝血酶调节蛋白 (throbomodulin, TM) 抗体.方法运用基因免疫法,即PCR特异性扩增TM胞外编码区所有碱基片段(包括信号肽,TMLEO),构建pcDNA3.1/TMLEO真核表达质粒.以碱裂解法提取,PEG沉淀法纯化质粒.将纯化后的质粒pcDNA3.1/TMLEO经生理盐水稀释后直接肌肉注射免疫BALB/c小鼠,检测质粒pcDNA3.1/TMLEO在小鼠体内有无表达以及TM抗体的效价和特异性.结果通过RT-PCR以及TM含量测定在RNA以及蛋白水平上均说明质粒pcDNA3.1/TMLEO在小鼠体内有表达.以EVC-304包板的cell-ELISA检测抗体滴度, 随着免疫次数的增加,小鼠血清抗体滴度明显增加,到第五次达到最高1∶ 8 000,第6～7次均保持在这一水平.小鼠抗血清通过免疫印迹(Western blot)和免疫组织化学鉴定,特异性好.结论在天然TM提取纯化困难的情况下,通过基因免疫制备抗体是可行的.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王鸿利	上海第二医科大学医学检验重点实验室	155	1583	20.0	35.0
2	李稻	上海第二医科大学医学检验重点实验室	19	72	4.0	7.0
3	王红	上海第二医科大学医学检验重点实验室	21	70	4.0	7.0
4	郑佐娅	上海第二医科大学医学检验重点实验室	22	122	6.0	10.0
5	钱高潮	徐州医学院附属医院检验科	2	2	1.0	1.0