重组日本血吸虫26 ku谷胱甘肽-硫-转移酶的表达、纯化及其免疫特性分析用于急性血吸虫病免疫诊断

• 作者: 刘淼 汪学龙 沈继龙 王家传 罗庆礼 胡元生 袁小松 钟政荣
• 来源期刊: 安徽医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 血吸虫,日本 谷胱甘肽转移酶 血吸虫病/诊断 酶联免疫吸附测定
• 年，卷（期）: 2005,（6）
• 所属期刊栏目: 基础医学研究
• 页码范围: 491-494
• 页数: 4页
• 分类号: R532.21|R345.5
• 字数: 3163字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-1492.2005.06.001

摘要

目的将日本血吸虫(中国大陆株)26 ku谷胱甘肽-硫-转移酶(26 ku SjGST)基因克隆入pET28a(+)并诱导表达26 ku rSjGST蛋白,纯化并用于急性血吸虫病免疫诊断.方法构建重组质粒pET28a-SjGST,转化到E.coli BL21,经IPTG诱导表达并进行SDS变性蛋白质电泳,以小鼠抗GST单克隆抗体为一抗,进行Western-blot分析.用His·BandPurification Kit亲和层析纯化重组蛋白,以此重组蛋白作为抗原,用ELISA法检测急性血吸虫患者血清和非流行区正常人血清. 结果成功地构建了重组质粒pET28a-SjGST,SDS变性蛋白质电泳显示可见一与预期分子量大小相符的特异蛋白条带的表达.Western blot分析表明,该重组蛋白能被小鼠抗GST单克隆抗体识别.ELISA结果表明,rSj GST用于急性血吸虫患者血清中抗体检测的阳性率为92.3%.结论 rSj GST得到表达和纯化,该重组蛋白用于急性血吸虫患者血清中抗体的检测具有良好的免疫反应性,为进一步探讨其在血吸虫病诊断中的应用奠定了基础.