R-工程菌表达产物酯酶 B1的固定化及其降解特性

• 作者: 张杰 薛庆节 闫艳春
• 来源期刊: 农业环境科学学报
• 关键词: 酯酶 B1 固定化酶 降解
• 年，卷（期）: 2005,（2）
• 页码范围: 299-303
• 页数: 5页
• 分类号: X7
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1672-2043.2005.02.020

摘要

将抗性库蚊的解毒酶基因克隆到大肠杆菌中,得到 R-工程菌,该工程菌的表达产物酯酶 B1能高效降解有机磷、有机氯、氨基甲酸酯、菊酯等 4大类农药.本研究将重组质粒 pRL-B1转入大肠杆菌 DH5α,以 5%的接种量转接到 LB液体培养基中,37 ℃振荡培养 13 h.超声波破碎工程菌,20%～80%的硫酸铵沉淀粗提后,采用海藻酸钙将 R-工程菌表达产物酯酶 B1进行固定化,并测定了固定化酶对其特异性底物α-乙酸萘酯的降解特性.结果表明,酶的最佳固定化浓度为 0.15 g·L-1,最佳固定化时间为 12 h,固定化酶最佳反应 pH为 7.0～7.5,最适温度为 40 ℃, 固定化酶显示出很高的热稳定性和重复使用稳定性,在常温下其半衰期为 12 d,利用双倒数法确定固定化酶的 Km为 1.8× 10-3 mmol·L-1, Vmax为 1.45× 104U·g-1,固定化酶的 Km是液态酶(1.35× 10-3mmol·L-1)的 1.33倍,Vmax只有液态酶(2.7× 104U·mL-1)的近 1/2.利用气相色谱测得其对有机磷农药对硫磷(1605)的降解率在 30 min内达 53.8%.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	闫艳春	山东农业大学生命科学学院	31	878	18.0	29.0
2	薛庆节	山东农业大学生命科学学院	5	65	4.0	5.0