重组腺相关病毒介导核心蛋白聚糖基因转染对SiHa细胞周期和凋亡的影响

• 作者: 汪培华 汪道文 肖啸 赵春霞 赵荫涛
• 来源期刊: 癌症
• 学科: 医学
• 关键词: 宫颈癌细胞 核心蛋白聚糖 克隆 细胞周期 凋亡
• 年，卷（期）: 2005,（1）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 28-32
• 页数: 5页
• 分类号: R737.33
• 字数: 3960字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-467X.2005.01.006

摘要

背景与目的:核心蛋白聚糖(decorin,DCN)是一种多效性分子,具有许多重要功能.本研究旨在通过重组腺相关病毒(recombinant adeno-associated virus vector,rAAV)载体介导DCN基因转染宫颈癌细胞(SiHa),观察其在SiHa细胞的表达及其对细胞周期和细胞凋亡的影响.方法:根据GenBank报道的DCN基因cDNA序列,克隆含开放读码框的DCN基因片段,测序后克隆至质粒UF1(UF1·DCN),通过磷酸钙-DNA沉淀法共转染293细胞,产生高滴度的含DCN基因的重组腺相关病毒(rAAV·DCN).用rAAV·DCN转染处于对数生长期的SiHa细胞,并以rAAV·LacZ转染和非转染细胞作对照.通过Western blot分析DCN的表达,PI染色流式细胞仪分析细胞周期的变化及DCN对细胞凋亡的影响.结果:获得了含开放读码框的人DCN基因片段(1 080 bp).成功包装至重组腺相关病毒载体获得高滴度的rAAV·DCN重组体,转染SiHa细胞后能有效表达DCN并使细胞周期发生明显变化,G1期细胞百分率[(72.3±23)%vs.(59.5±2.5)%]明显增加,S期[(11.9±1.9)%vs.(17.8±0.8)%]和G2期[(13.4±1.1)%vs.(21.5±0.9)%]细胞百分率明显降低;对细胞凋亡无明显影响.结论:DCN高表达对SiHa细胞增殖周期有明显阻滞作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	汪道文	华中科技大学同济医学院附属同济医院内科及基因治疗中心	177	1061	17.0	24.0
2	汪培华	华中科技大学同济医学院附属同济医院内科及基因治疗中心	20	126	7.0	10.0
3	肖啸	华中科技大学同济医学院附属同济医院内科及基因治疗中心	16	52	4.0	6.0
4	赵春霞	华中科技大学同济医学院附属同济医院内科及基因治疗中心	24	154	6.0	11.0
5	赵荫涛	华中科技大学同济医学院附属同济医院内科及基因治疗中心	4	33	3.0	4.0