斑节对虾溶菌酶基因的原核表达与产物活性检测

• 作者: 劳海华 叶星 吴锐全 白俊杰 罗建仁 郑清梅
• 来源期刊: 水产学报
• 学科: 农学
• 关键词: 斑节对虾 溶菌酶基因 原核表达 溶菌活性
• 年，卷（期）: 2005,（1）
• 页码范围: 20-24
• 页数: 5页
• 分类号: S917
• 字数: 3625字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-0615.2005.01.004

摘要

采用PCR方法对所克隆的斑节对虾溶菌酶基因的cDNA进行改造,并克隆至含温控启动子PRPL的大肠杆菌表达质粒pBV220,构建斑节对虾溶菌酶表达载体pBV220-lyz.该质粒转化大肠杆菌后经42℃诱导表达.SDS-PAGE电泳表明,表达产物中有16kD左右的特异性条带,与预期斑节对虾溶菌酶分子量相符.薄层扫描显示,重组斑节对虾溶菌酶约占全菌总蛋白的32%,纯化后的重组斑节对虾溶菌酶占全菌可溶性蛋白的90%左右.比浊法检测复性后产物的生物活性,结果表明重组斑节对虾溶菌酶的最适pH为6.0,最适温度为40℃.测定了重组斑节对虾溶菌酶对溶壁微球菌和几种鱼病原菌菌株的溶菌活力,结果表明,重组斑节对虾溶菌酶对溶壁微球菌、溶藻弧菌和鳗弧菌有较强的溶菌活力,对爱德华氏菌有一定的溶菌活力,对嗜水气单胞菌、副溶血弧菌和大肠杆菌DH5α溶菌活力较弱.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	白俊杰	中国水产科学研究院珠江水产研究所	104	1312	20.0	28.0
2	叶星	中国水产科学研究院珠江水产研究所	84	1239	20.0	31.0
3	吴锐全	中国水产科学研究院珠江水产研究所	61	881	19.0	27.0
4	劳海华	中国水产科学研究院珠江水产研究所	27	387	12.0	18.0
5	罗建仁	中国水产科学研究院珠江水产研究所	61	724	17.0	22.0
6	郑清梅	中国水产科学研究院珠江水产研究所	4	122	4.0	4.0