新基因pp3774的亚细胞定位以及在肝癌细胞系和组织中的表达谱研究

• 作者: 万大方 张锋锐 徐文 朱丽 李锦军 王春艳 葛超 陈燕 顾健人
• 来源期刊: 肿瘤
• 学科: 医学
• 关键词: 肝肿瘤 癌,肝细胞 基因pp3774 基因表达
• 年，卷（期）: 2005,（6）
• 所属期刊栏目: 快速报道
• 页码范围: 519-524
• 页数: 6页
• 分类号: R735.7
• 字数: 4625字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3781/j.issn.1000-7431.2005.06.002

摘要

目的探讨新基因pp3774在肝癌细胞系、人肝癌及癌旁肝、肝硬化以及正常肝组织中的表达差异及其生物学功能.方法脂质体转染-荧光观察pp3774-GFP融合蛋白的亚细胞定位;合成新基因pp3774特异性多肽,制备兔源性多克隆抗体;用RT-PCR、蛋白印迹、免疫细胞化学及免疫组化方法检测pp3774基因在7个肝癌细胞系及214例肝细胞癌、18例肝硬化及10例正常肝组织中的表达差异.流式细胞术检测转染pp3774基因的SMMC-7721细胞的凋亡率.结果 pp3774蛋白主要定位于细胞质(内质网为主);RT-PCR检测结果表明pp3774 mRNA在肝癌细胞系BEL-7402、Huh-7、MHCC-97L及HepG2中高表达,SMMC-7721、MHCC-LM3及人永生化肝细胞系L-02中度表达,而在Hep3B中低表达;肝癌及癌旁组织中pp3774 mRNA的表达表现为癌旁高于癌(P<0.05);免疫组化结果显示pp3774蛋白表达程度依次为正常肝≥肝硬化≥癌旁肝组织>肝癌.转染pp3774基因的SMMC-7721细胞的凋亡发生率高于对照组约10%.结论 pp3774基因是一个具有抑制肝癌细胞生长功能的新基因.