以S区为靶位的小干扰RNA抗乙型肝炎病毒的实验研究

• 来源期刊: 中华医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 肝炎病毒,乙型 基因表达 病毒复制 RNA干扰
• 年，卷（期）: 2005,（35）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 2503-2506
• 页数: 4页
• 分类号: R5
• 字数: 3288字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j:issn:0376-2491.2005.35.014

摘要

目的以乙型肝炎病毒(HBV)S基因区为靶位,构建表达siRNA的质粒载体pSilencer3.1-H1hygro,体外观察siRNA抗HBV的效果.方法以HepG2.2.15细胞为靶细胞,利用脂质体Metafectene转染表达siRNA的质粒载体pSilencer3.1-H1hygro于细胞中,用时间分辨免疫荧光分析法(IFMA法)检测细胞上清中HBsAg和HBeAg,用定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测细胞上清DNA,用逆转录(RT)-PCR检测HBV mRNA.结果成功构建了表达siRNA的转录质粒载体,siRNA可抑制HBV的抗原表达和病毒复制,1、2、4 μg siRNA对HBsAg的抑制率分别为75%、82%、89%;对HBeAg的抑制率分别为32%、38%、43%;对HBV DNA的抑制率分别为30%、43%、49%;对HBV RNA的抑制率分别为30%、70%、90%.结论靶向HBV S区的siRNA能抑制HBV的抗原表达和复制;siRNA抑制作用呈剂量依赖性和序列特异性.