脂质-聚阳离子-CDKN1B质粒复合物的构建、特性和转染

• 作者: 乔守怡 孙逊 张凌 张宏炜 易韬 桑颖颖
• 来源期刊: 中华医学遗传学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: CDKN1B基因 基因传递 脂质-聚阳离子-DNA复合物 非病毒载体
• 年，卷（期）: 2005,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 502-506
• 页数: 5页
• 分类号: R3
• 字数: 1087字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j.issn:1003-9406.2005.05.006

摘要

目的研究开发一种能有效转染 CDKN1B基因进入肺和肝癌细胞的非病毒基因传递系统.方法重组构建了含有 CDKN1B序列和EYFP报告基因的质粒.该重组DNA与鱼精蛋白缩合后再与脂质体作用形成脂质-聚阳离子-DNA复合物(lipids-polycation-DNA-complex, LPDs),分别用激光粒度仪法和透射电镜法研究该LPDs的理化性质;用该LPDs转染几种肺癌、肝癌细胞;该LPDs中的EYFP在A549 细胞中的表达情况用荧光显微镜和流式细胞仪观察和评价;在LLC肺癌细胞、Chang正常肝细胞和7721肝癌细胞中表达的CDKN1B蛋白用Western印迹方法分析.结果该LPDs为凹陷的球状;平均粒径是167 nm,多分散指数为0.35;平均zeta电位为+32.6 mV;从A549细胞的荧光显微照片可清楚观察到EYFP的表达;A549细胞的流式细胞仪分析结果显示,LPDs的转染效率与阳性对照LipofectAMINE(R) 的转染效率相当;Western印迹法分析显示,以LPDs装载的 CDKN1B质粒在LLC细胞、常细胞和7721细胞中表达CDKN1B蛋白,而裸 CDKN1B质粒没有表达.结论脂质-聚阳离子- CDKN1B质粒复合物的构建是成功的.LPDs能够将 CDKN1B质粒传递到肺癌细胞和肝癌细胞,并获得高效率的表达.因此,这种基因传递系统有望开发用作肺癌和肝癌的基因治疗传递系统.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	孙逊	四川大学华西药学院	50	195	8.0	11.0
2	张宏炜	四川大学华西药学院	4	35	2.0	4.0
3	易韬	四川大学华西药学院	5	5	1.0	2.0