恶性疟原虫AMA-1(Ⅲ)基因在毕赤酵母系统中的高效表达

• 作者: 宫玉香 张忠广 赵恒梅
• 来源期刊: 中国人兽共患病杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 疟原虫 恶性 裂殖子顶端膜抗原1 疟疾疫苗 毕赤氏酵母
• 年，卷（期）: 2005,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 240-243
• 页数: 4页
• 分类号: R382.3
• 字数: 3824字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2005.03.014

摘要

目的利用毕赤酵母高效表达系统表达用于下游实验的恶性疟原虫AMA-1(Ⅲ)重组蛋白.方法将测序正确的AMA-1(Ⅲ)基因插入毕赤酵母分泌型表达载体pPIC9k中,用高压电穿孔转化法将目的基因转化入酵母感受态细胞GS115,筛选高拷贝转化子,利用甲醇进行诱导表达.表达产物用SDS-PAGE和免疫印迹进行检测.结果 AMA-1(Ⅲ)蛋白表达于培养上清,蛋白的相对分子质量分别为16.3ku,免疫印迹结果表明AMA-1(Ⅲ)基因表达蛋白能被抗AMA-1(Ⅲ)的单抗所识别,出现特异条带,推算AMA-1(Ⅲ)蛋白的表达量为0.8g/L.结论酵母细胞表达系统可高效表达在构象方面接近天然蛋白的AMA-1(Ⅲ)重组蛋白.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张忠广	青岛大学医学院人体寄生虫学教研室	36	69	5.0	6.0
2	赵恒梅	青岛大学医学院人体寄生虫学教研室	14	47	4.0	6.0
3	宫玉香	青岛大学医学院人体寄生虫学教研室	30	79	5.0	7.0