肿瘤及胚胎特异表达蛋白CEP65的真核细胞表达及其细胞定位

• 来源期刊: 癌症
• 学科: 生物学
• 关键词: 胚胎 肿瘤 CEP65 真核表达 荧光蛋白
• 年，卷（期）: 2005,（5）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 573-576
• 页数: 4页
• 分类号: Q78
• 字数: 3364字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-467X.2005.05.012

摘要

背景与目的:既往研究表明,肿瘤相关抗原CEP65(cancer and embryo expression protein 65)仅表达于肿瘤和胚胎组织,本研究拟揭示CEP65在细胞中的分布,为进一步阐明CEP65在肿瘤发生、发展中的功能奠定基础.方法:构建肿瘤及胚胎特异表达基因Cep65与GST融合表达的真核表达质粒,通过DEAEDextran方法转染COS7细胞,分离细胞的胞浆蛋白和核蛋白,Western blot检测CEP65在细胞中的分布情况.构建Cep65与红色荧光蛋白基因融合表达的真核表达质粒,转染细胞后,利用荧光显微镜观察CEP65在细胞中的分布.结果:通过细胞组分生化分析分离细胞胞浆蛋白和核蛋白,Western blot检测结果表明,表达的CEP65分布在细胞浆和细胞核中.荧光蛋白定位进一步分析发现,转染单纯荧光蛋白表达质粒的细胞,其荧光在细胞内呈弥散性分布,而转染CEP65与荧光蛋白基因融合表达质粒的细胞,在细胞质及细胞核内形成聚集的荧光颗粒.结论:CEP65可在COS7细胞中高效表达,其表达产物存在于细胞质和细胞核内:CEP65可能是一种核相关蛋白.