成年大鼠海马神经前体细胞表达功能性的L-型钙通道

• 作者: 冯锦丽 施志敏 朱心红 李晓文 杨建明 田映红 胡德辉 陈明 高天明
• 来源期刊: 生物化学与生物物理进展
• 学科: 生物学
• 关键词: 成年大鼠 海马 神经前体细胞 L-型钙通道
• 年，卷（期）: 2005,（9）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 822-828
• 页数: 7页
• 分类号: Q2
• 字数: 5413字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-3282.2005.09.004

摘要

为了建立一种能够获得高纯度成年大鼠海马神经前体细胞(HPCs)的体外贴壁培养方法,并鉴定HPCs上是否存在功能性L-型钙通道,分离Wistar成年大鼠海马组织,制成单细胞悬液,利用无血清培养技术,在添加碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、表皮生长因子(EGF)、N2和B27 supplement的DMEM/F12培养液中进行培养.连续传代,采用细胞免疫荧光法对第六代细胞进行鉴定,呈巢蛋白(nestin)阳性的细胞可达99.9%.把培养高纯度的细胞在分化培养基中诱导分化14天后,表现为神经元和星形胶质细胞的形态,且分别呈Ⅲ型β-微管蛋白(Tujl)阳性和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)阳性.细胞免疫荧光和免疫印迹结果显示,HPCs表达L-型钙通道的Cav1.2α1C和Cav1.3α1D亚单位,共聚焦钙成像证明了功能性L-型钙通道的存在,并且利用全细胞膜片钳技术记录到了L-型钙电流.以上结果表明成年Wistar大鼠的海马HPCs可表达功能性的L-型钙通道.