野生型和G88C突变型α-synuclein基因真核表达质粒构建

• 作者: 倪培华 刘振国 李琳 陈生弟
• 来源期刊: 上海医学
• 关键词: α-synuclein 基因 定点突变
• 年，卷（期）: 2005,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 58-60
• 页数: 3页
• 分类号: R3
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0253-9934.2005.01.019

摘要

目的构建人野生型和突变型(G88C)α-synuclein基因真核表达载体.方法采用逆转录-聚合酶链反应从人胚脑组织中扩增人α-synuclein基因,克隆至pMD18-T中.采用SOE法定点突变获得G88C突变型α-synuclein基因,并将其克隆至pMD18-T中.酶切鉴定后将野生型和突变型(G88C)α-synuclein基因亚克隆至真核表达质粒pcDNA3.1+中.结果酶切及DNA测序结果证实,野生型和突变型α-synuclein基因分别插入到pcDNA3.1+中,野生型α-synuclein基因序列与基因库(登录号L08850)完全一致,突变型(G88C)α-synuclein 基因除第88位碱基G被C替代以外,其余序列与野生型完全一致.结论构建野生型和G88C突变型α-synuclein基因真核表达质粒为研究人α-synuclein基因的功能及其突变体的致病机制奠定了基础.