应用犬骨髓间充质干细胞体外构建组织工程心脏瓣膜的实验研究

• 作者: 刘维永 卫向阳 宿学家 李悟 欧阳辉 郑奇军 陈文生 顾春虎
• 来源期刊: 心脏杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 干细胞 种子细胞 组织工程 心脏瓣膜,去细胞 犬
• 年，卷（期）: 2005,（4）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 337-340
• 页数: 4页
• 分类号: R654
• 字数: 3864字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-7236.2005.04.009

摘要

目的:将犬骨髓间充质干细胞(BMSCs)分离、自然扩增后,体外与去细胞猪主动脉瓣复合构成组织工程瓣膜(TEHV),观察其生长情况,以评价其作为组织工程心脏瓣膜种子细胞的可行性.方法:采用密度梯度离心及贴壁筛选法分离犬的BMSCs,培养扩增,用免疫组化的方法进行鉴定;采用本实验室方法构建的生物材料--去细胞猪主动脉瓣为支架,种植犬的BMSCs,静态培养7～10 d;进行组织学切片及扫描、透射电镜观察,并进行机械力学性能检测.结果:分离的BMSCs细胞免疫组化显示SH2、Vimentin、α-SMA(+),CD34、Ⅷ因子、Laminin(-),生长扩增能力强,2周内经3代培养即可扩增到(5.57±0.34)×107细胞数量级;组织工程瓣组织学示活组织和细胞外基质(extracellularmatrix,ECM)形成;扫描电镜见细胞贴附均匀,透射电镜可见分泌活性的肌纤维细胞样细胞(含actin/myosin纤维、胶原纤维、弹性蛋白);机械力学性能得到保留.结论:使用本方法可以构建成功组织工程心脏瓣膜;BMSCs与去细胞猪主动脉瓣的相容性良好,可以作为种子细胞之一.