具血型转换功能的咖啡α-半乳糖苷酶基因的克隆与表达

• 作者: 梁素钰 郑学勤
• 来源期刊: 遗传
• 学科: 生物学
• 关键词: α-半乳糖苷酶 cDNA克隆 咖啡豆 B→O血型转换 P.pastoris
• 年，卷（期）: 2005,（5）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 759-764
• 页数: 6页
• 分类号: Q78
• 字数: 3880字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0253-9772.2005.05.014

摘要

从大粒种咖啡(Coffea liberica)和中粒种咖啡(Coffea canephora)中分离克隆到了α-半乳糖苷酶(α-D-gal-actosidase)cDNA的开放阅读框架即编码区,分别记为Gal-D与Gal-Z,长度与已发表的小粒种咖啡cDNA编码序列相同均为1 089 bp,同源性与已发表的小粒种咖啡cDNA编码序列相比分别为98.7%和99.27%.将克隆到的Gal-D与Gal-Z用巴斯德毕赤氏酵母Pichia pastoris表达载体pPICZαA(分泌甲醇诱导型)和pGAPZαA(分泌组成型)成功地构建了如下酵母表达载体:pPICZαA/Gal-Z,pPICZαA/Gal-D和pGAPZαA/Gal-D,并转入酵母宿主菌GS115进行了发酵表达研究.实验得出工程菌株pPICZαA/Gal-D/GS115的重组表达产物酶活最高可达48 22(U/mL),对发酵产物进行了SDS-PAGE电泳,得到一条清晰的主条带.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郑学勤	中国热带农业科学院热带生物技术研究所热带作物生物技术国家重点实验室	85	1513	21.0	34.0
2	梁素钰	中国热带农业科学院热带生物技术研究所热带作物生物技术国家重点实验室	1	5	1.0	1.0