醛糖还原酶影响转化生长因子β1诱导的大鼠系膜细胞纤连蛋白和Ⅳ型胶原蛋白表达及其机制的研究

• 作者: 张农 林伊凤 蒋涛 赵仲华 车祺 陈琦
• 来源期刊: 中华医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 醛还原酶 转化生长因子β 纤连蛋白类 胶原 有丝分裂素激活蛋白激酶类
• 年，卷（期）: 2005,（26）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1820-1826
• 页数: 7页
• 分类号: R5
• 字数: 5729字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j:issn:0376-2491.2005.26.007

摘要

目的探讨醛糖还原酶(AR)对转化生长因子β1(TGF-β1)诱导的大鼠系膜细胞(MsC)细胞外基质成分纤连蛋白(FN)和IV型胶原(Col IV)蛋白表达的影响及其可能涉及的信号传导通路.方法经亚克隆构建AR真核表达质粒pCDNA3-AR,经脂质体介导及G418筛选后,将pCDNA3-AR稳定转染至大鼠MsC中.应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)、Western 印迹法和免疫荧光法检测转染MsC表达AR情况;以Western 印迹法检测正常MsC、AR转基因MsC,应用醛糖还原酶抑制剂(ARI)Sorbinil和Zopolrestat分别孵育的MsC:在TGF-β1刺激前后的FN、Col IV以及MAPK/phospho-MAPK表达变化.结果与正常MsC相比,两种ARI--Sorbinil和Zopolrestat均可下调MsC的FN和Col IV蛋白表达,而AR转基因MsC 中FN和Col IV表达均升高(均P<0.05);TGF-β1作用后,MsC的FN和Col IV蛋白表达升高,预先使用Sorbinil或Zopolrestat孵育后,二者表达均下降,而AR转基因MsC 中二者表达进一步增高(均P<0.05).各组细胞在TGF-β1刺激前后总ERK、JNK和p38表达均无明显变化.正常MsC在TGF-β1刺激后phospho-ERK、phospho-JNK、phospho-p38表达升高,与之相比,若预先使用Sorbinil或Zopolrestat孵育后,则phospho-JNK、phospho-p38表达下降,AR转基因MsC 中phospho-JNK表达更为升高(P<0.05).结论 AR基因作为TGF-β1反应性基因之一,可能参与TGF-β1诱导的FN和Col IV表达的调控,且AR的作用有可能与TGF-β1刺激后的JNK-MAPK和p38-MAPK信号通路的活化有关.AR可能参与了非糖尿病导致的肾小球纤维化、硬化的病理发展过程.