人肺癌组织总RNA转染树突状细胞方法的优化

• 作者: 吴一龙 周清 徐崇锐 杨学宁 林嘉颖 王坤 黄少琼
• 来源期刊: 中国肺癌杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 肺肿瘤 树突状细胞 疫苗
• 年，卷（期）: 2005,（6）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 489-494
• 页数: 6页
• 分类号: R734.2|Q78
• 字数: 5079字
• 语种: 中文

摘要

背景与目的树突状细胞(dendritic cell,DCs)作为体内惟一能活化初始T细胞的抗原递呈细胞,是激发机体特异性免疫反应的关键,以DCs为基础构建的疫苗广泛应用于各种肿瘤免疫治疗中.其中RNA转染DCs构建DCs疫苗的方法,因避免了抗原的筛选和鉴定,所需肿瘤量小等优点,特别适于像肺癌这样的缺乏特异性肿瘤抗原、异质性大、抗原性弱的肿瘤.然而,目前缺乏RNA转染DCs的最佳时间和方法的研究.本研究以人肺癌组织总RNA体外转染DCs,试图摸索转染DCs的最佳条件.方法用免疫组化的方法选择肿瘤组织癌胚抗原CEA、粘蛋白MUC1双阳性的10例肺癌患者,一步法提取肿瘤组织总RNA,采集和分离外周血单核细胞,体外培养DCs和T细胞,将RNA于不同时间和不同方法转染DCs,用流式细胞仪检测CEA和MUC1的表达,混合淋巴细胞反应测定DCs刺激自体T细胞增殖能力.结果未成熟期DCs转染人肺癌总RNA后CEA和MUC1表达量(11.33±2.64和39.68±7.25)明显高于成熟期DCs(5.46±1.63和27.17±4.16),且刺激自身T细胞增殖反应能力更强.电穿孔法转染人肺癌总RNA后DCs表达CEA和MUC1的量(20.53±3.64和65.39±9.33)明显多于脂质体转染(11.33±2.64和39.68±7.25)和直接混合法(0.91±0.27和18.53±3.26),且刺激自身T细胞增殖反应能力更强.结论采用电穿孔法将肺癌总RNA体外转染未成熟DCs可以使DCs表达肿瘤抗原量更高,刺激T细胞增殖的活性更强.