胆囊癌hTR反义RNA基因真核表达载体的构建

• 作者: 刘贤锡 姜希宏 张峰 王伟 王学浩 靳斌
• 来源期刊: 江苏医药
• 关键词: 胆囊癌 端粒酶 反义核糖核酸 基因表达
• 年，卷（期）: 2005,（1）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 21-23
• 页数: 3页
• 字数: 2047字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0253-3685.2005.01.008

摘要

目的采用RT-PCR法,提取胆囊癌细胞内的端粒酶RNA(hTR)基因,并针对其序列设计反义RNA切割基因序列,并将其构建入真核表达载体pTriEx-4内.方法根据hTRcDNA序列,设计引物,经RT-PCR法从体外培养的胆囊癌细胞内调取hTR模板区基因,根据其测序结果,合成反义RNA基因,与经相应酶切的真核表达载体连接,酶切鉴定重组体的正确性.结果经RT-PCR从细胞内调出68bp序列,与hTRcDNA比较,与模板区域碱基序列一致.反义RNA基因重组子经酶切鉴定序列正确.结论RT-PCR法可调出胆囊癌hTR基因有效片段,成功构建了针对hTR模板区的反义RNA基因的真核表达载体,为胆囊癌的基因治疗奠定了良好的基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王伟	山东大学分子生物学实验中心	232	1688	18.0	29.0
2	王学浩	南京医科大学第一附属医院肝脏移植中心	205	907	13.0	17.0
3	姜希宏		43	285	10.0	15.0
4	张峰	南京医科大学第一附属医院肝脏移植中心	140	658	12.0	16.0
5	刘贤锡	山东大学分子生物学实验中心	65	213	7.0	11.0
6	靳斌	南京医科大学第一附属医院肝脏移植中心	3	5	1.0	2.0