C型产气荚膜梭菌β2毒素基因的克隆与表达

• 作者: 王玉炯 许崇利 许崇波
• 来源期刊: 生物技术
• 学科: 农学
• 关键词: C型产气荚膜梭菌 β2毒素基因 基因克隆 基因表达
• 年，卷（期）: 2005,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1-3
• 页数: 3页
• 分类号: S852|Q786
• 字数: 2169字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-311X.2005.05.001

摘要

利用PCR技术,从C型产气荚膜梭菌染色体基因组中扩增了0.72kb的β2毒素基因,将纯化的PCR产物与载体pGEM-T连接,转化至受体菌JM109中,经NcoI/BamHI和BamHI/EcoRI酶切鉴定及核苷酸序列测定证实,重组质粒pXCPB2中含有β2毒素基因.随后用NcoI/BamHI酶切质粒pXCPB2,回收β2毒素基因片段,插入到事先经同样酶切处理的载体pET-28c中相应酶切位点,构建了表达质粒pETXB2,经NcoI/BamHI和NcoI/HindⅢ/BamHI酶切鉴定及核苷酸序列测定证实,表达质粒含有β2毒素基因且基因序列和阅读框架正确.重组菌株BL21(DE3)(pETXB2)表达产物经ELJSA检测和SDS-PAGE分析,重组菌株表达的β2毒素蛋白能够被β2毒素抗体识别,其表达量占菌体总蛋白相对含量的13.26%.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	许崇波	大连大学生物工程学院	70	565	12.0	20.0
2	王玉炯	宁夏大学生命科学学院	108	671	13.0	20.0
3	许崇利	宁夏大学生命科学学院	8	77	5.0	8.0