灭活病毒诱导牙鲆传代细胞差减cDNA文库的构建及分析

• 作者: 张奇亚 杜昌升 桂建芳 苗大利 董彩文
• 来源期刊: 高技术通讯
• 关键词: 抑制差减杂交(SSH) 差减cDNA文库 牙鲆传代细胞 鱼类抗病毒相关基因
• 年，卷（期）: 2005,（1）
• 所属期刊栏目: 资源环境技术
• 页码范围: 79-82
• 页数: 4页
• 字数: 3877字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1002-0470.2005.01.018

摘要

以灭活大鳞鲆弹状病毒诱导的牙鲆(Paralichthys olivaceus)传代细胞作为检测子(tester),正常对照细胞作为驱赶子(driver),分别提取mRNA,逆转录合成双链cDNA.经两轮差减杂交,两轮抑制性PCR扩增后,取正向差减的PCR产物与T载体连接,构建抑制差减cDNA文库,随机挑取7400余个克隆,对其中4200多个克隆进行PCR扩增鉴定,发现近4000个克隆中均含有插入片段,大小在250～1000bps之间,进一步对含有插入片段的近4000个克隆进行了斑点杂交筛选,得到近668个可能含有抗病毒或与免疫相关的阳性克隆.初步的结果表明所建立的差减cDNA文库适合进一步克隆鱼类抗病毒相关新基因.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张奇亚	中国科学院水生生物研究所淡水生态与生物技术国家重点实验室	60	602	14.0	21.0
2	桂建芳	中国科学院水生生物研究所淡水生态与生物技术国家重点实验室	118	1687	24.0	35.0
3	杜昌升	中国科学院水生生物研究所淡水生态与生物技术国家重点实验室	1	5	1.0	1.0
4	董彩文	中国科学院水生生物研究所淡水生态与生物技术国家重点实验室	1	5	1.0	1.0
5	苗大利	中国科学院水生生物研究所淡水生态与生物技术国家重点实验室	1	5	1.0	1.0