实时聚合酶链反应熔解曲线分析检测APC基因突变

• 来源期刊: 中华病理学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 聚合酶链反应 基因,APC 结肠直肠肿瘤
• 年，卷（期）: 2005,（10）
• 所属期刊栏目: 实验病理学
• 页码范围: 669-671
• 页数: 3页
• 分类号: R3
• 字数: 2528字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j.issn:0529-5807.2005.10.017

摘要

目的建立一种准确、方便、价廉、适合临床的APC基因突变检测方法.方法采用SYBR GreenⅠ为实时聚合酶链反应(PCR)指示剂,首先从基因组DNA中扩增包含突变位点的靶基因(270 bp),并通过熔解曲线分析确定产物;再以上述片段为模板扩增特定长度的小片段(40/35 bp),以0.5℃/step的速率,获得从65℃到99℃的熔解曲线以检测APC_1309位5 bp缺失突变.结果临床标本检测结果表明:18例结直肠肿瘤患者石蜡组织标本中检出APC_1309位5 bp缺失突变7例,20例正常人外周血标本检测结果均为阴性.结论实时PCR熔解曲线法设计简单,操作简便,结果可靠,可望应用于临床APC基因突变检测,并可推荐用于其他基因突变的检测.