摘要:
目的:观察具有活血化瘀、软坚散结、补肾益气功效的中药蜂贝化瘀胶囊对糖尿病大鼠血尿代谢指标和肾脏细胞凋亡及Fas和Fas-L表达的影响.方法:①实验于2002-10/2003-10在潍坊医学院分子免疫实验室完成.选用30只8周龄健康雄性Wistar大鼠.②喂养1周后,随机选用22只大鼠,将其造成糖尿病模型:按50 mg/kg腹腔注射链脲佐菌素(溶于0.1 mol/L枸橼酸钠缓冲液中,pH 4.5),72 h后血糖值达16.7 mmol/L者确定为糖尿病模型.将造模成功的16只大鼠分为2组:模型组和中药组各8只.设其余8只为对照组(只注射相同体积的枸橼酸钠缓冲液).中药组根据每只大鼠体质量(按大鼠体表面积换算成等效剂量21.6 g/kg)每日给予五六个蜂贝化瘀胶囊(主要成分:黄芪30 g,黄精30g,蜂胶15 g,丹参30 g葛根15 g,生地30 g,浙贝母15 g,菟丝子30 g)中的粉末进行灌胃,喂养10周,自由饮水.正常组及模型组用普通饲料喂服10周,自由饮水.③血糖、血肌酐、尿肌酐、尿素氮、尿蛋白测定采用日立7170A全自动生化分析仪,计算肌酐清除率[尿肌酐浓度(mg/d)×尿量(mL/min)/血肌酐浓度(mL/d)].采用原位末端标记法检测肾脏细胞凋亡情况.采用免疫组化法和流式细胞仪检测Fas和Fas-L表达,以荧光指数[(样品的平均荧光强度-对照样品平均荧光强度)/正常组织平均荧光强度]表示Fas及Fas-L的相对含量.④用t检验比较组间差异.结果:大鼠30只中因造模失败脱失6只,进入结果分析24只.①血糖、尿素氮、尿蛋白:模型组明显高于对照组和中药组(t=2.25~5.36,P<0.05~0.01).②内生肌酐清除率:三组相近(P>0.05).③单个肾小球细胞凋亡率和肾小管细胞凋亡率:模型组均明显高于对照组和中药组[(1.89±0.03)%,(13.85±0.53)%;0,(2.91±0.30)%;(0.65±0.03)%,(9.98±0.81)%,t=2.27~5.15,P<0.05~0.01].④Fas和Fas-L荧光指数:模型组均明显高于对照组和中药组(1.51±0.07,1.69±0.11;1.00±0.02,1.00±0.02;1.25±0.02,1.31±0.12,t=2.39~4.85,P<0.05~0.01).结论:蜂贝化瘀胶囊可能通过影响凋亡相关蛋白Fas和Fas-L的表达而抑制肾脏细胞凋亡,从而改善大鼠血尿代谢指标,发挥对肾脏的保护作用.