提高农杆菌基因转化率方法的研究

• 作者: 张富春 曾幼玲 李金耀 王艳 秦丽 蒋刚强 贺宾
• 来源期刊: 生物技术
• 学科: 生物学
• 关键词: 带柄子叶 转化效率 预培养 对数期菌液浓度 筛选体系
• 年，卷（期）: 2005,（6）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 51-53
• 页数: 3页
• 分类号: Q789
• 字数: 3626字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-311X.2005.06.022

摘要

通过甘蓝型油菜带柄子叶转化过程中转化受体是否进行预培处理、转化前菌液的对数浓度确定以及合适的再生筛选体系的摸索,研究了提高农杆菌基因转化效率的方法.试验结果表明:转化受体经过MD培养基3d的预培处理,用处于对数生长期OD600为0.6～0.8的菌液稀释至所需浸染浓度,浸染所需时间共培后,转入降低卡那霉素浓度的初筛分化培养基中,再经过后期较高浓度的卡那霉素继代筛选培养,大大提高了转化后卡那霉素抗性绿苗的得率.此研究不仅优化了油菜的转化体系和提高了油菜的转化效率,而且为农杆菌转化其它不同物种的受体材料提供了可指导的借鉴.