应用激光捕获显微切割技术分离肝癌石蜡组织标本中细菌及螺杆菌基因的检测

• 作者: 代洪 应若素 张艳 田雪飞 范学工 黄燕
• 来源期刊: 中华微生物学和免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 肝癌 幽门螺杆菌 激光捕获显微切割
• 年，卷（期）: 2005,（4）
• 所属期刊栏目: 细菌学
• 页码范围: 324-328
• 页数: 5页
• 分类号: R3
• 字数: 4731字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j:issn:0254-5101.2005.04.021

摘要

目的对肝癌石蜡组织标本病理切片中发现的细菌进行分离鉴定. 方法 38例肝癌石蜡组织标本经聚合酶链反应(PCR)扩增螺杆菌16S rRNA,阳性标本病理切片后行石炭酸-碱性品红染色观察幽门螺杆菌(H.pylori),应用激光捕获显微切割技术(LCM)分离光镜下观察到的细菌,分离的细菌经PCR扩增螺杆菌16S rRNA,PCR产物进行测序及同源比较,阳性者再扩增H.pylori的特异基因[相对分子质量(Mr)为26×103蛋白,H.pylori种特异抗原]和相关功能基因(cagA, vacA). 结果15例肝癌石蜡组织标本中检测到螺杆菌16S rRNA,选取观察到细菌数量较多的6例用于LCM分离.分离的6例细菌样本均扩增出螺杆菌16S rRNA,经测序与H.pylori有99%～100%的同源性.4例Mr为26×103蛋白基因阳性,1例扩增出cagA基因,未扩增出vacA基因. 结论肝癌石蜡组织中经PCR检测到的H.pylori就是病理观察到的细菌.