家蝇抗菌肽Cecropin-His_6融合基因的克隆、序列分析及其表达载体构建

• 作者: 徐建华 朱家勇 许琴英 金小宝
• 来源期刊: 生物技术
• 学科: 生物学
• 关键词: 家蝇 抗菌肽 基因克隆 生物信息学分析 真核表达载体
• 年，卷（期）: 2005,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 3-7
• 页数: 5页
• 分类号: Q785|Q786
• 字数: 5112字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-311X.2005.01.002

摘要

克隆家蝇幼虫抗菌肽Cecropin-His_6融合基因,构建其真核表达载体,为更深入的抗菌肽活性研究及制备新型肽类抗生素创造条件.该文从家蝇幼虫组织中提取总RNA,RT-PCR扩增编码Cecropin开放阅读框cDNA序列,将其克隆至pUCm-T载体进行序列测定；然后用含6×His标签序列的下游引物克隆Cecropin-His_6融合基因,并将其构建于真核表达载体pcDNA3.1(+)中；同时应用生物信息学对融合基因的理化性质和二级结构进行预测分析.结果表明,RT-PCR扩增得到约230bp的目的cDNA片段,与Genebank中报道的家蝇Cecropin cDNA序列存在一个无义变异差异(Lys:AAG→AAA)；6×His标签成功融合到Cecropin的C端.Cecropin-His_6融合基因的克隆和真核表达载体的成功构建,为进一步制备抗耐药菌的肽类抗生素奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	朱家勇	广东药学院生物技术实验室	121	797	13.0	22.0
2	金小宝	广东药学院生物技术实验室	100	490	12.0	15.0
3	徐建华	广东药学院生物技术实验室	6	133	4.0	6.0
4	许琴英	广东药学院生物技术实验室	1	18	1.0	1.0