牛胚胎生殖细胞的分离与培养

• 作者: 华进联 徐小明 杨继建 窦忠英 葛秀国
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 牛 原始生殖细胞 胚胎干细胞
• 年，卷（期）: 2005,（12）
• 所属期刊栏目: 畜牧
• 页码范围: 1275-1280
• 页数: 6页
• 分类号: S858.27|S858.23|Q813.1
• 字数: 5137字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0366-6964.2005.12.007

摘要

以牛胎儿为材料,从原始生殖细胞(PGC)分离培养出胚胎生殖细胞(EG),并进行传代和鉴定,对影响胚胎生殖细胞分离与培养的因素进行了探讨,研究发现以共培养方式培养牛原始生殖细胞时,原代培养都可以出现大量形态较好的EG细胞集落,说明同源的体细胞可以很好地支持PGC的生长和增殖,组织块培养细胞克隆数目较少,PGC很难增殖,不能形成典型的集落,传代也不理想,只传了一代.同时比较了不同传代方法对牛胚胎生殖细胞细胞传代的影响,发现消化+机械分离法和消化+吹打法都可以用于EG细胞的传代.消化+吹打法操作简单,省时省力,也能够很好的保持细胞的增殖活力.原代培养的牛原代胚胎生殖细胞进行了细胞表面标志抗原SSEA-1,3,4鉴定,呈弱阳性.细胞体外培养可以分化为成纤维样细胞、上皮样细胞和类胚体.