碱裂解法提取细菌质粒DNA的改良

• 作者: 孙世孟 徐丽娟 薛仁镐 谢宏峰 郭宝太 金圣爱 默书霞
• 来源期刊: 生物技术
• 学科: 生物学
• 关键词: 改良 快速提取 细菌 质粒DNA
• 年，卷（期）: 2005,（3）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 44-46
• 页数: 3页
• 分类号: Q503
• 字数: 2083字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-311X.2005.03.019

摘要

碱裂解法是目前最为广泛应用的细菌质粒DNA的提取方法.但该法提取DNA所需时间较长,通常需要2h以上.为了快速提取质粒DNA,对常规碱裂法中溶液Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、RNA酶A及无水乙醇的反应时间由原来的5min、5min、10min、30min、10min分别缩短至5s、1min、5s、10min、5min.这种改良方法极大地缩短了DNA的提取时间,可在30min内完成整个DNA的制备,且制备的DNA可直接应用于进一步的酶切、连接及PCR等各种分子生物学分析.