双自杀基因慢病毒转移系统的建立及其对T淋巴细胞的体外杀伤作用

• 作者: 倪淑琴 刘春生 姜义荣 李湘新 陈学良 马道新
• 来源期刊: 基础医学与临床
• 学科: 医学
• 关键词: 慢病毒 自杀基因 T淋巴细胞
• 年，卷（期）: 2005,（8）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 725-730
• 页数: 6页
• 分类号: R733.4
• 字数: 4802字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-6325.2005.08.011

摘要

目的利用分子生物学方法构建CD和TK双自杀基因慢病毒转移载体.方法将慢病毒基因转移系统中的3种成分质粒(包膜质粒、包装质粒及目的基因转移质粒)用脂质体共转染入病毒包装细胞293T,荧光显微镜下观察;透射电镜下观察病毒颗粒;大量收集病毒上清,浓缩后用之感染T淋巴细胞,荧光显微镜下观察.结果荧光显微镜观察到对照组大量绿色荧光蛋白(GFP);透射电镜证实有大量病毒颗粒存在.单独使用前体药物5-氟脲嘧啶(5-FC)和/或无环鸟苷(GCV)后,细胞的存活率与未转染T淋巴细胞比较,差异显著(P＜0.01),与单独使用5-FC或GCV比较,联合使用5-FC和GCV时T细胞的存活率明显降低(P＜0.01).结论慢病毒基因转移系统可使双自杀基因发挥强大的杀伤作用,为一种有效的基因转移系统.