运用siRNA抑制K562细胞中端粒酶逆转录酶基因表达的研究

• 作者: 何蕴韶 吴健 王伟毅 王方金
• 来源期刊: 临床内科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 小分子干扰RNA RNA干扰 端粒酶 端粒酶逆转录酶基因
• 年，卷（期）: 2005,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 330-332
• 页数: 3页
• 分类号: R782
• 字数: 3157字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-9057.2005.05.016

摘要

目的建立利用小分子干扰RNA(siRNA)技术抑制白血病细胞系K562细胞中端粒酶活性的方法,为肿瘤的基因治疗提供理论依据.方法设计端粒酶逆转录酶(hTERT)基因特异性siRNA,用体外转录方法合成hTERT基因的siRNA并转染K562细胞,培养48小时后,收集细胞,应用实时荧光定量RT-PCR和western blot方法检测转染细胞中hTERT基因 mRNA水平和蛋白表达量的变化,并运用TRAP ELISA方法检测细胞内端粒酶活性的变化.结果转染siRNA后,与对照组相比,实验组hTERT mRNA水平和蛋白表达量明显降低,抑制率分别为75%和60%,同时TRAP ELISA方法检测发现实验组端粒酶活性仅为对照组活性的 45%.结论 hTERT siRNA能特异性的抑制hTERT基因的表达,降低端粒酶活性,因此运用siRNA来抑制hTERT的表达可达到降低端粒酶活性的效果.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王伟毅	中山大学达安基因诊断中心	9	87	5.0	9.0