酶联免疫分析法探测Cry1Ab蛋白在不同介质中的构象变化

• 作者: 刘维屏 叶庆富 奚凤娜 邬建敏
• 来源期刊: 分析化学
• 学科: 化学
• 关键词: 酶联免疫分析 Cry1Ab蛋白 构象 转基因植物
• 年，卷（期）: 2005,（8）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 1105-1108
• 页数: 4页
• 分类号: O6
• 字数: 2807字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0253-3820.2005.08.012

摘要

采用酶联免疫分析(ELISA)方法,根据构象变化后的蛋白与抗体结合能力下降从而导致ELISA测定值降低的原理,探测了转cry1Ab基因水稻表达的Cry1Ab蛋白在不同溶液介质中的热致构象变化行为,以及不同有机溶剂及溶液pH值对该蛋白构象变化的影响程度.实验表明,CrylAb蛋白在不同条件下的构象变化程度可以灵敏地通过ELISA方法检测.在不同的介质中,Cry1Ab蛋白的热致构象变化程度不同.在Na2SO4介质中,该蛋白具有较高的热稳定性;SDS的存在,可以促进该蛋白的构象变化.常温下,25%(V/V)的有机溶剂乙腈、异丙醇、甲醇、乙醇均能使该蛋白的构象发生转变,其中以乙腈最为显著.醇类溶剂对Cry1Ab蛋白的构象影响程度随疏水性增大而增大;溶液pH值也对该蛋白的构象变化产生影响.pH在 8～10之间,该蛋白构象能保持稳定;酸或过碱性的溶液均能使蛋白构象偏离原始状态,从而引起ELISA测定值的降低.另外,腐殖酸能在一定时间内保持Cry1Ab蛋白构象的稳定性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘维屏	浙江大学环境科学研究所	130	4039	39.0	57.0
2	叶庆富	浙江大学原子核农业科学研究所	62	1299	19.0	33.0
3	邬建敏	浙江大学理学院化学系	23	299	9.0	17.0
4	奚凤娜	浙江大学理学院化学系	3	9	2.0	3.0