缺氧反应元件启动子表达反义血管内皮生长因子(VEGF)165 cDNA靶向性抑制骨肉瘤细胞VEGF表达

• 作者: 丘钜世 乔慧 张萌 彭挺生 李扬 李晋云 梁惠珍 汪睿 王燕
• 来源期刊: 中华病理学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 骨肉瘤 内皮生长因子 新生血管化,病理性 细胞,培养的
• 年，卷（期）: 2005,（9）
• 所属期刊栏目: 实验病理学
• 页码范围: 588-591
• 页数: 4页
• 分类号: R73
• 字数: 3596字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j.issn:0529-5807.2005.09.011

摘要

目的以缺氧诱导因子-1/缺氧反应元件(HIF-1/HRE)基因调节系统为载体,构建含HRE启动子的人反义血管内皮生长因子(VEGF)165 cDNA真核表达载体,探讨其对缺氧条件下骨肉瘤细胞VEGF表达的靶向性抑制作用.方法采用聚合酶链反应(PCR)和DNA重组技术构建由HRE启动子驱动的含荧光素酶(Luc)报告基因和人反义VEGF165 cDNA全长的真核表达质粒,将其转染骨肉瘤细胞系MG63,用液闪计数仪测定缺氧对报告基因表达的调节,酶链免疫吸附试验(ELISA)法检测缺氧条件下细胞VEGF表达的变化.结果成功构建了由HRE启动子驱动的含Luc和反义VEGF165 cDNA全长的真核表达质粒pBI-HRE-Luc-AsVEGF165,该质粒转染骨肉瘤细胞系,缺氧条件下可使报告基因在肿瘤细胞中的表达提高3.5×102倍,使肿瘤细胞VEGF分泌下降45%.结论利用肿瘤缺氧,HRE启动子能够实现反义VEGF165的高效表达,为开展靶向性抗肿瘤血管生成治疗提供了实验依据.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王燕	昆明医学院第二附属医院病理科	23	55	4.0	6.0
2	李晋云	昆明医学院附属第二医院病理科	18	26	2.0	5.0
3	汪睿		3	29	2.0	3.0