脱氧核酶对cip1/waf1 mRNA的切割及对人绒毛膜癌细胞凋亡相关基因表达的影响

• 作者: 何惠娟 吴柱国 张毅 李明意 李震 杨展 赵家明
• 来源期刊: 第三军医大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 催化性DNA cip1/waf1 绒毛膜癌 bcl-2 bax
• 年，卷（期）: 2005,（7）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 636-639
• 页数: 4页
• 分类号: Q556.4|R394.2|R737.33
• 字数: 3612字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-5404.2005.07.016

摘要

目的探讨脱氧核酶对cip1/waf1 mRNA的切割作用及对人绒毛膜癌细胞凋亡相关基因表达的影响.方法针对cip1/waf1基因的核苷酸序列,合成"10～23"型脱氧核酶及其类似物,提取总RNA在体外切割cip1/waf1 mRNA;转染绒毛膜癌细胞后,用RT-PCR扩增和荧光免疫方法测定cip1/waf1和凋亡相关基因bcl-2和bax的表达.结果未经修饰的脱氧核酶DzT和在DzT的3′末段添加倒位连接T碱基的脱氧核酶DzTi在体外能够有效地切割cip1/waf1 mRNA;在转染绒毛膜癌细胞后,DzTi比DzT对cip1/waf1 mRNA表现出更强的切割作用,能显著地降低细胞内cip1/waf1蛋白(p21cip1/waf1蛋白或p21蛋白)水平(P＜0.01),下调bax基因的表达(P＜0.05),但对bcl-2基因的表达和细胞的生长未表现出显著的影响(P＞0.05).DzT和DzTi的催化中心的一个碱基被替换后形成的脱氧寡核苷酸DzT′和DzTi′在胞外和胞内均不表现对cip1/waf1 mRNA的切割作用.结论人工合成的脱氧核酶确实能够高效特异地切割cip1/waf1 mRNA,并能上调凋亡促进基因bax的表达,表明脱氧核酶确实能够通过切割cip1/waf1 mRNA来参与细胞的凋亡过程.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张毅	广东医学院附属医院中心实验室	28	214	7.0	14.0
2	何惠娟	广东医学院附属医院中心实验室	51	362	10.0	17.0
3	杨展	广东医学院附属医院中心实验室	33	185	8.0	11.0
4	吴柱国	广东医学院附属医院中心实验室	46	188	8.0	11.0
5	李明意	广东医学院附属医院中心实验室	42	140	6.0	8.0
6	赵家明	广东医学院附属医院中心实验室	24	86	6.0	7.0
7	李震	广东医学院附属医院中心实验室	12	48	4.0	6.0